concentracion de Naclo y tiempos para desinfecciode de meritemos etc.

CONCENTRACIONES DE Naclo Y TIEMPOS PARA LA DESINFECCIÓN DE MERISTEMOS, HOJAS, SEMILLAS Y SEGMENTOS NODALES (YEMAS).

El hipoclorito de sodio se encuentra en solución acuosa, conformando el 5% de la solución como naocl, y el agua constituye el restante 95%.

PROPIEDAD VALOR

propiedad	valor
Peso Molecular (g/mol)	74,4
Estado fisico	liquido
Punto de Ebullición (ºC) (760 mmHg)	120 (Concentración cloro activo: 6.5%) 40 (5% de NaOCl en agua)
Punto de Fusión (ºC)	8,6 (Concentración cloro activo: 6.5%) -6 (5% de NaOCl en agua)
Presión de Vapor (mmHg)	17,5 a 20oC (5% de NaOCl en agua)
Gravedad Específica (Agua = 1)	1,11 - 1,2 a 25ºC, agua 4ºC (Concentración cloro activo: 6.5%) 1,07 - 1,14 (5% de NaOCl en agua)
Densidad del Vapor (Aire = 1)	No Reportado

PROPIEDADES FÍSICAS PARA EL HIPOCLORITO DE SODIO.

P PROPIEDADPPROPIEDAD	VALOR
Velocidad de Evaporación (Acetato de Butilo = 1)	No Reportado
Solubilidad en Agua	Soluble en agua fría, se descompone en agua caliente (Concentración cloro activo: 6,5%) 100% en agua (5% de NaOCl en agua)
Límites de Inflamabilidad (% vol)	No combustible
Temperatura de Auto ignición (ºC)	No reportado
Punto de Inflamación (ºC)	No reportado
pH	12 (Concentración cloro activo: 6,5%) 9-10 (5% de NaOCl en agua)

Sección de microesquejes que contienen un nudo con su yema, lavarlos con agua y jabón azul. Colocarlos en una solución de cloro comercial al 20% y agitar en una plancha magnética por 15 a 20 minutos. En la cámara de flujo laminar lavar las secciones de tallo con agua destilada estéril.

Desinfección de ápices de yuca, con soluciones de hipoclorito de sodio bajo tres concentraciones y tres tiempos de inmersión.

Se emplearon ápices meristemáticos de 1 mm de longitud provenientes de brotes recolectados en una plantación comercial.

Los tratamientos estuvieron conformados por tres concentraciones de hipoclorito de sodio (5,25%): 10, 20 y 30 % (C10, C20 y C30, respectivamente), combinadas con tres tiempos de inmersión: 10, 20 y 30 min (T10, T20 y T30, respectivamente).

BIBLIOGRAFÍA:

www.minambiente.gov.co/documentos/Guia18.pdf

www.bioline.org.br/pdf?cg06008

temperatura y tiempo en la esterilizacion por calor seco y autoclave.

TABLA DE TEMPERATURA Y TIEMPO EN LA ESTERILIZACIÓN POR CALOR SECO.

La esterilización por calor seco produce la destrucción de los microorganismos por oxidación de sus componentes celulares. Éste es un proceso menos eficiente que la esterilización por calor húmedo, porque los microorganismos mueren con mayor rapidez cuando se encuentran en presencia de agua, ya que éste permite que se altere con mayor facilidad la configuración de sus proteínas y proporciona un medio para distribuir el calor uniformemente en toda la cámara interna del equipo de esterilización. Por esta razón, para lograr la esterilización del material empleando el calor seco, se deben aplicar temperaturas más altas durante mayor tiempo.

La esterilización por calor seco se puede realizar por varios métodos:

• Aire caliente

• Llama directa

• Incineración

Relaciones tiempo / temperatura en la esterilización por calor seco:

180 ºC	30 minutos
170 ºC	60 minutos
160°C	120 minutos
150 ºC	150 minutos
140°C	180 minutos
120 ºC	6 horas

VOLUMEN Y TIEMPO EN LA ESTERILIZACIÓN POR AUTOCLAVE.

Efecto del tamaño del recipiente sobre los tiempos de esterilización en autoclave para soluciones liquidas.
TAMAÑO DEL RECIPIENTE	VOLUMEN DEL LIQUIDO	TIEMPO DE ESTERILIZACIÓN (MIN)
Tubo de ensayo: 18 x 15 mm	10 ml	15
Erlenmeyer: 125 ml	95 ml	15
Erlenmeyer: 2 000 ml	1 5000 ml	30
Frasco de fermentación: 9 000 ml	67590 ml	70

BIBLIOGRAFÍA:

ü           www.slideshare.net/elcrack_10jm/exposicion-autoclave

ü http://www.mcgraw-hill.es/bcv/guide/capitulo/8448164180.pdf

MEDIOS DE CULTIVO DEFINIDOS E INDEFINIDOS (PLANTAS)

MEDIOS DEFINIDOS DE CULTIVO DEFINIDOS E INDEFINIDOS (PARA PLANTAS)

 MEDIOS DE CULTIVOS DEFINIDOS

Son medios de cultivo que se caracterizan por su composición química es decir que  se conoce exactamente la cantidad de cada uno de los compuestos que hay en el medio; se conocen tanto como (cualitativa y cuantitativamente) posteriormente se detallan algunos de los medios de cultivos.

Knudson (1946)

El primer medio conocido es el adecuado para de orquídeas. Bastante pobre en sales.

Macronutrientes
(NH4)2SO4	0.5 g/l
MgSO4	0.122 g/l
Ca(NO3)2	0.694 g/l
KH2PO4	0.250 g/l
Micronutrientes
KI	0.83 mg/l
H3BO3	0.056 mg/l
MnSO4.H2O	5.68 mg/l
MoO3	0.016 mg/l
CuSO4.5H2O	0.062 mg/l
FeSO4.7H2O	25.0 mg/l

White (1963)

Es uno de los medios, si no el mas, diluido de que se dispone, y por lo tanto de uso complementario al MS. Se elaboró para cultivo de raíces de tomate.

Macronutrientes
Ca(NO3)24H2O	0.3 g/l
KNO3	0.08 g/l
MgSO4.7H2O	0.72 g/l
Na2SO4	0.2 g/l
NaH2PO4.H2O	0.019g/l
Micronutrientes
KCl	65 mg/l
KI	0.75 mg/l
H3BO3	1.3 mg/l
MnSO4.7H2O	7 mg/l
ZnSO4.7H20	3 mg/l
Na2MoO4.2H2O	0.25 mg/l
CuSO4.5H2O	0.025 mg/l
CoCl2.6H2O	0.025 mg/l
Na2.EDTA	37.3 mg/l

 Medio MS fue desarrollado para el cultivo de explantes de tabaco y la formulación se basa en el análisis de los compuestos minerales presentes en el tejido de tabaco en sí. It. Se caracteriza por sus altos niveles de sal, en particular sales de K y N

(g/l) (NH4 )NO3                            1.650 KNO3                                   1.900  CaCl2.2H2O                          0.440 MgSO4.7H2O                        0.370 KH2PO4                                0.170                        MS X 10 FeSO4.7H2O                         0.0278 Na2EDTA. 2H2O                  0.0372                     MS X 200 MnSO4.H2O                          0.0169 ZnSO4.7H2O                          0.0086 H3BO3                                   0.0062 KI                                         0.00083 Na2MoO4.2H2O                     0.00025 CuSO4.5H2O                         0.000025 CoCl2.6H2O                          0.000025           MS X 100 Mioinositol                           0.100 Tiamina HCl                        0.0001 Acido nicotínico                   0.0005 Piridoxina HCl                    0.0005 Glicina                                 0.002                  MS X 200 SACAROSA                                                30 g. AGAR-AGAR                                               7 g. B5 (Gamborg, 1970-1976) Gamborg trabajó activamente en la elaboración de medios, a los que dio diferentes números. EL B5 fue formulado para cultivo de callo de soja.

Macronutrientes
(NH4)2SO4	0.134 g/l
KNO3	2.528 g/l
MgSO4.7H2O	0.246 g/l
CaCl2.aq	0.15 g/l
KH2PO4	0.15 g/l
Micronutrientes
KI	0.75 mg/l
H3BO3	3.0 mg/l
MnSO4.H2O	10 mg/l
ZnSO4.7H20	2.0 mg/l
Na2MoO4.2H2O	0.25 mg/l
CuSO4.5H2O	0.025 mg/l
CoCl2.6H2O	0.025 mg/l
Na2.EDTA	37.3 mg/l
FeSO4.7H2O	27.8 mg/l

MEDIO HELLER

Este medio es usado para semillas  de Duraznero.

ZNSO4. 7H2O	1 mg/L
H3BO3	1 mg/L
MnSO4. 4H2O	0.10 mg/L
CuSO4. 5H2O	1.03  mg/L
Al Cl 3	0.03 mg/L
NiCl2.6H2O	0.03  mg/L
KI	0.01 mg/L

MEDIO J-19

Sales B5
Cinetina	1.0 mg/L
ANA	1.0 mg/L
m-Inositol	160 mg/L
Sacarosa	20 mg/L
pH	5.6

Medio E-10

Sales B5
2,4-D	1.0 mg/L
BAP	0.5 mg/L
AIA	0.5 mg/L
Glucosa	0.5  mg/L
Sacarosa	20%

MEDIOS DE CULTIVO INDEFINIDOs.

·         Jugos de frutas u hortalizas (sustancias naturales que son utilizadas como medio de cultivo); como ejemplo: (Naranja, banano, piña, tomate, patata, leche de coco, agua de coco etc.).

·       Caseína hidrolizada, como por ejemplo: Su uso es desaconsejable por no poder darse una composición precisa del extracto añadido, pueden resultar útiles sólo en casos concretos.

    PREPARACIÓN DEL AGAR CON EXTRACTO DE MALTA Extracto de Malta 10 g
Agar-Agar 15 g

JUGO V-8 Jugo V-8
Carbonato de calcio
Agar-Agar
Agua destilada

 agua de coco (10-20%), extractos de levadura se emplea en concentraciones de 0.01-0.05%, caseína hidrolizada se emplea desde 0.01% a 1.0% y extracto de malta que se adiciona desde 0.1 –0.5

BIBLIOGRAFIA:

webapp.ciat.cgiar.org/biotechnology/cultivo.../capitulo3_parte1.pdf

                                 www.pv.fagro.edu.uy/fitopato/.../03-Medios_de_cultivos.pdf